Полный набор для тестирования Xenometrix umuC содержит все компоненты, необходимые для проведения теста на индукционную генотоксичность umuC SOS в соответствии со стандартом ISO 13829 в формате 96-луночного микропланшета.
Обзор протокола: исследуемый штамм TA1535/pSK1002 культивируется в течение ночи в среде LB с ампициллином, после чего подвергается воздействию исследуемого вещества (с метаболической активацией S9 и без неё) в течение 2 часов при температуре 37 °C; количественная оценка SOS-индукции осуществляется по активности бета-галактозидазы, измеряемой после добавления субстрата ONPG, при этом результаты выражаются в виде коэффициента индукции (IF) относительно контроля с растворителем; генотоксичность определяется как IF, равный или превышающий 1,5, при отсутствии цитотоксичности.
Компоненты набора: лиофилизированный тестовый штамм TA1535/pSK1002 с протоколом восстановления; бульон LB с ампициллином (исходный раствор ампициллина 200 мг/мл); раствор субстрата ONPG (о-нитрофенил-бета-D-галактопиранозид); положительный контроль 4-нитрохинолин-1-оксид (4-NQO) (прямого действия); положительный контроль 2-аминоантрацен (2-AA) (S9-зависимый); лизирующий буфер натрия фосфата; буфер Z с бета-меркаптоэтанолом. Фракция S9 для метаболической активации доступна отдельно — см. «S9 печени крысы» и «Кофактор S9» в подкатегории «Компоненты теста Эймса».
